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    除了Thermo CLONED AMV FIRST STRA SYN KIT,还有哪些常用的逆转录试剂盒?

    更新时间:2025-06-18      点击次数:86
    除了 Thermo CLONED AMV FIRST STRA SYN KIT,还有不少在分子生物学研究中广泛应用的逆转录试剂盒,它们各有特点,适用于不同的实验需求。


    高容量 cDNA 逆转录试剂盒(High - Capacity cDNA Reverse Transcription Kit):由 Thermo Fisher Scientific 推出,完成一次逆转录反应耗时 120 分钟 。该试剂盒能够从多种 RNA 样本,如总 RNA 或 mRNA 中高效合成 cDNA,为后续大规模的基因表达分析、分子克隆等实验提供充足的模板,适用于对 cDNA 产量有较高要求的实验场景,例如构建 cDNA 文库时,可获得丰富的 cDNA 资源。


    SuperScript™ III 第一链合成系统(SuperScript™ III First - Strand Synthesis System for RT - PCR):同样来自 Thermo Fisher Scientific,专为从纯化的 poly (A)+ 或总 RNA 合成第一链 cDNA 而优化。其使用的 SuperScript III 逆转录酶,可在较宽温度范围工作,对于具有复杂二级结构的 RNA 模板,能通过适当提高反应温度来破坏结构,保障逆转录顺利进行,在研究一些富含 GC 区域的基因表达时优势明显,能准确将对应的 RNA 逆转录为 cDNA。


    Revertaid 第一链 cDNA 合成试剂盒(Revertaid First Strand cDNA Synthesis Kit):此试剂盒的组成十分全面,包含 Revertaid 逆转录酶、RiboLock RNase 抑制剂、5X 反应缓冲液、dNTP mix、oligo (dT) 18 引物、随机六聚体引物、对照 GAPDH RNA、正向和反向 GAPDH 引物以及无核酸酶水 。它在 60 分钟内即可完成逆转录反应,对 RNA 模板的适用性广,无论是常规的 mRNA,还是一些具有特殊结构的 RNA,都能实现高效逆转录,常用于基础科研中对细胞内各类基因表达情况的初步检测。


    TaqMan™逆转录试剂(TaqMan™ Reverse Transcription Reagents):该试剂盒专为逆转录反应设计,最佳反应温度为 42°C,采用 Multiscribe 逆转录酶 。它与 TaqMan 实时定量 PCR 技术配套使用时效果,能够精准地将 RNA 逆转录为 cDNA,并为后续基于 TaqMan 探针的定量 PCR 提供高质量模板,在对基因表达进行精准定量分析,如疾病相关基因的表达量变化研究中应用广泛。


    Roche 逆转录试剂盒(RT - PCR Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit):核心成分 Transcriptor 逆转录酶是在大肠杆菌中重组表达的,具有 RNA 指导的 DNA 聚合酶活性、DNA 依赖的 DNA 聚合酶活性、解旋活性以及可降解 RNA - DNA 杂合链中 RNA 的 RNase H 活性,这使得逆转录后无需额外进行耗时的 RNase H 孵育步骤,缩短了反应时间并降低成本 。该酶热稳定性高,可在高达 65°C 的温度下工作,能合成长达 14 kb 的 cDNA 产物,特别适用于具有高二级结构的富含 GC 模板的逆转录,同时试剂盒提供了随机六聚体引物和锚定 oligo (dT) 18 引物等多种引物选择,满足不同类型 RNA 逆转录需求,在长片段基因的研究、复杂 RNA 样本的分析中表现出色。


    逆转录系统(Reverse Transcription System - Promega):利用 AMV 逆转录酶,可在 15 分钟内高效地将 RNA 逆转录为 cDNA,合成的 cDNA 可直接用于多次 PCR 扩增 。试剂盒中同时包含 oligo (dT) 15 和随机引物,适用于几乎任何 RNA 来源的逆转录,还提供了一个 1.2 kb 的聚腺苷酸化 RNA 转录本作为 cDNA 合成的对照模板,方便研究人员优化实验参数、排查实验问题,在对实验时间要求较高,且需要快速获得可靠逆转录结果的情况下,如紧急的病毒 RNA 检测中较为适用。


    Scriptum 第一链 cDNA 合成试剂盒(Scriptum First cDNA Synthesis Kit):涵盖了第一链 cDNA 合成所需的所有试剂,使用优质的逆转录酶、超纯 dNTPs 和优化的反应缓冲液,确保结果具有高重复性 。其逆转录酶是经重组生产的 M - MLV 逆转录酶改良版本,消除了 RNase H 活性且提高了热稳定性,能够合成高度结构化的长 cDNA 片段,实现极其灵敏且高度特异的 RT - PCR 反应,可用于 DNA 标记等实验,在对 cDNA 质量和实验特异性要求严格的分子生物学实验,如基因功能验证相关的精确表达分析中发挥重要作用。


    这些不同的逆转录试剂盒,凭借各自的性能和特点,为科研人员在基因表达分析、病毒学研究、分子克隆等诸多领域的研究工作提供了多样化的选择



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