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    蛋白胨(Peptone)用户指南

    更新时间:2025-04-17      点击次数:401

    蛋白胨(Peptone)用户指南

    ——微生物培养基核心成分的专业解析

    一、产品概述

    蛋白胨(Peptone)是一种由动物组织(如牛肉、酪蛋白)或植物蛋白(如大豆)经酶解或酸水解制备的氮源物质,广泛用于微生物培养基的配制。其核心功能包括:

    • 提供氮源:为微生物生长提供氨基酸、多肽及小分子肽类。

    • 促进生长:含维生素、矿物质等微量成分,加速菌体代谢。

    • 增强适应性:不同来源的蛋白胨可优化特定菌株的生长环境。

    二、分类与特性


    类型原料来源适用场景特点
    动物源蛋白胨牛肉、猪骨细菌、真菌培养(如大肠杆菌、酵母)氨基酸组成丰富,含维生素B族
    植物源蛋白胨大豆、小麦乳酸菌、植物内生菌培养低过敏原性,适合植物共生菌研究
    酪蛋白胨牛奶酪蛋白分子生物学实验(如质粒转化)纯度高,批次间稳定性强
    胰蛋白胨动物胰酶水解高要求微生物(如支原体、衣原体)富含支链氨基酸,促进细胞膜合成


    三、技术参数


    指标标准值检测方法
    总氮含量≥12.0%凯氏定氮法
    氨基酸含量≥8.0%高效液相色谱法(HPLC)
    灰分≤5.0%灼烧法
    pH值(1%水溶液)6.5-7.5电位滴定法
    溶解性全溶,无沉淀目视观察


    四、操作指南

    1. 培养基配制

      • 按配方比例称取蛋白胨(如LB培养基:10 g/L蛋白胨),加入蒸馏水搅拌溶解。

      • 调节pH至目标值(如7.0±0.2),121℃高压灭菌20分钟。

    2. 无菌操作

      • 灭菌后培养基需在超净台内分装,避免二次污染。

      • 固体培养基冷却至50-55℃时倒平板,防止冷凝水过多。

    3. 储存条件

      • 未开封的蛋白胨需密封保存于干燥阴凉处,避免吸潮结块。

      • 开封后建议分装,4℃冷藏保存,有效期6个月。

    五、应用场景

    • 微生物发酵:作为氮源用于抗生素(如青霉素)、氨基酸(如谷氨酸)的生产。

    • 分子生物学:在LB、SOB等培养基中促进质粒扩增和转化效率。

    • 食品微生物检测:用于沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的分离培养。

    • 环境科学:研究土壤微生物群落对不同氮源的响应。

    六、质量验证

    1. 微生物生长测试

      • 在LB培养基中接种大肠杆菌(E. coli),37℃培养12小时后,菌落直径应≥2 mm。

    2. 氨基酸谱分析

      • 使用HPLC检测,必需氨基酸(如亮氨酸、异亮氨酸)占比≥30%。

    3. 无菌验证

      • 按《中国药典》2020版要求,37℃培养7天,无菌生长。

    七、注意事项

    1. 原料溯源

      • 动物源蛋白胨需确认原料无疯牛?。˙SE)风险,植物源需避免转基因成分。

    2. 批次一致性

      • 长期实验建议使用同一供应商的同一批次产品,减少实验误差。

    3. 替代方案

      • 对高成本实验,可尝试酵母提取物(Yeast Extract)部分替代蛋白胨(比例1:1)。

    八、常见问题解答

    • Q:蛋白胨结块是否影响使用?
      A:轻微结块可微波低火加热溶解,严重结块需更换新批次。

    • Q:如何降低培养基泡沫?
      A:减少蛋白胨用量至8 g/L,或添加0.1%消泡剂(如聚二甲基硅氧烷)。

    • Q:蛋白胨与水解酪蛋白(Casein Hydrolysate)的区别?
      A:蛋白胨为多肽混合物,水解酪蛋白为更小分子肽,适合不同菌株需求。

    九、供应商信息

    • 推荐品牌:Oxoid、BD Difco、青岛海博生物

    • 检测标准:符合USP、EP、CP药典要求

    • 技术支持:提供氨基酸谱分析报告及微生物生长验证数据



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