Millipore MERS00002 细胞电阻仪科研应用指南

——跨上皮/内皮细胞屏障功能研究的精准测量方案

一、仪器原理与核心功能

1.1 电阻测量技术原理

TEER（跨上皮电阻）检测：

采用 AC 4-electrode系统（频率12.5Hz），避免电极极化

测量范围：0-20,000 Ω·cm2（分辨率1 Ω·cm2）

自动温度补偿（18-40℃）

1.2 关键技术创新

特性 MERS00002优势 传统伏欧计局限

电极设计 镀金叉指电极（防腐蚀） 银电极易硫化失效

自动化校准 一键校准（含空白补偿） 需手动计算净电阻值

多孔板兼容性 支持6/12/24-well inserts 仅适配单孔测量

1.3 典型研究应用

屏障模型构建验证：

? 肠上皮（Caco-2）、血脑屏障（hCMEC/D3）

? 肺部药物渗透性评估

? 紧密连接调控研究（如Claudin敲除影响）

二、标准化操作流程

2.1 实验前准备

电极维护：

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1. 使用后立即用去离子水冲洗  

2. 每月用70%乙醇消毒10分钟  

3. 避免触碰电极敏感区（图示红色区域）  

2.2 测量步骤

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1. 平衡：  

   - 细胞培养板室温平衡15分钟（减少温度梯度）  

2. 校准：  

   - 空insert测量3次→仪器自动计算背景电阻  

3. 检测：  

   - 电极垂直浸入液面1-2mm  

   - 稳定读数（波动<2%持续5秒）后记录  

2.3 数据标准化处理

TEER计算公式：

TEER (Ω·cm2) = (R_sample - R_blank) × 膜面积(cm2)

示例计算：

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测得电阻：350 Ω  

空白电阻：80 Ω  

Insert面积：0.33 cm2  

→ TEER = (350-80)×0.33 = 89.1 Ω·cm2  

三、性能验证与问题排查

3.1 质量控制标准

合格指标：

? 空白电阻CV<5%（同批次inserts）

? 标准电阻液（100Ω）测量误差<2%

? Caco-2单层第7天TEER≥300 Ω·cm2

3.2 典型问题诊断

现象 可能原因 解决方案

读数漂移 电极污染/气泡干扰 清洁电极/轻敲除气泡

TEER值异常低 细胞单层破损 显微镜检查完整性

负值显示 空白未校准/电极反接 重新校准/检查电极方向

3.3 应用案例数据

案例1：肠道屏障药物评估

结果示例：

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对照组：420±35 Ω·cm2  

药物X处理：180±22 Ω·cm2（p<0.001）  

案例2：BBB模型优化

TEER动态变化：

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第3天：85±12 Ω·cm2  

第7天：650±45 Ω·cm2（达到研究阈值）  

四、技术问答（Q&A）

Q1：能否用于气液界面（ALI）培养？

需配合 专用ALI适配器（Cat. MERSALI01），测量前加入50μL PBS润湿

Q2：如何判断细胞单层形成？

TEER达到平台期（连续3天变化<10%）+ 荧光素钠渗透率<0.5%/h

文档优化建议：

插入 【电极维护示意图】 标注敏感区域

添加 TEER计算模板 二维码（链接至Excel工具）

关键步骤用 ??警示框 强调（如"禁止高压灭菌电极"）