SDS-PAGE 一步法凝胶快速制备试剂盒

梯度凝胶预实验：若不确定目标蛋白最佳分离浓度，可利用试剂盒少量试剂制作梯度凝胶进行预实验。先将不同浓度凝胶溶液分层灌注，待聚合后进行电泳，通过预实验快速确定分离的凝胶浓度，节省正式实验时间和试剂用量。

多胶同步制备：当需同时处理多个样品时，根据试剂盒规格和电泳槽容量，可一次配制多份凝胶溶液，同时灌注多个凝胶。但要注意记录好各凝胶对应的样品信息，避免混淆。如进行蛋白质组学差异表达分析，一次制备多个凝胶，可同步分析不同样本，提高实验效率。

恒温设备辅助：在环境温度不稳定的情况下，使用恒温平台或水浴锅保持凝胶溶液和电泳槽温度恒定。如在寒冷环境中，将混合好的凝胶溶液放在 30℃恒温平台上，可加快凝胶聚合速度且保证聚合均匀性，避免因温度过低导致的聚合异常。

离心机妙用：混合凝胶溶液后，若溶液中仍有少量难以排出的气泡，可将盛放溶液的容器放入离心机，以低速（如 1000 - 2000 rpm）离心 1 - 2 分钟，使气泡集中到溶液表面，方便去除。

溶液预过滤：若怀疑预混试剂或添加的去离子水、缓冲液存在杂质，可使用 0.22μm 或 0.45μm 的滤膜对溶液进行过滤后再配制凝胶。尤其在对条带清晰度要求的实验中，过滤操作能有效去除可能影响蛋白质迁移的微小颗粒，提高凝胶质量。

加样孔修复：若拔梳子时不慎损坏加样孔，可在电泳前用少量未聚合的凝胶溶液对破损处进行修补。用微量移液器吸取凝胶溶液，小心滴加到破损加样孔处，待其聚合后，可一定程度恢复加样孔形状，减少对样品加样和电泳结果的影响。

试剂回收利用：试剂盒中未使用完且未受污染的试剂，如缓冲液等，可按照要求妥善保存，用于后续实验的清洗或其他辅助步骤。但要注意，已混合的凝胶溶液不可回收，避免污染其他试剂。

环保处理：实验产生的废弃凝胶和试剂，需按照实验室危险废物处理规定进行分类处置。聚丙烯酰胺凝胶虽低毒，但不可随意丢弃，应收集后进行无害化处理；含 SDS 等化学试剂的废液，需倒入指定的化学废液收集容器，统一交由专业机构处理，防止环境污染。